“梅里亚”推荐阅读【猪场兽医】猪高致病性蓝耳病毒与猪圆环病毒混合感染的诊治

猪蓝耳病

又称猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PPRS），其病原是猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），是造成成年母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道病症的重要病原之一。该病具有发病急、传播快、发病率高、死亡率高等特点，同时可引起免疫抑制而继发多种其他疾病。1987年该病首次于美国北卡罗纳州暴发，1991年欧洲暴发了毁灭性流行，造成了近百万头猪死亡，20世纪90年代早期传播至亚洲，日本和韩国各地相继报道了该病，我国在1995年首次暴发PRRS，目前，该病在全世界几乎所有养猪地区都有流行。Nsp2基因是PRRSV各毒株间差异最大的一个编码区，该基因的部分缺失会对病毒的毒力存在影响，高致病性PRRSV变异株的Nsp2基因存在2处不连续的共30个氨基酸的缺失。

猪圆环病毒病

是1991年才发现的猪的一种新的较为难以控制的传染病，其主要由猪圆环病毒2型（PCV2）感染引起。猪圆环病毒可靶向侵蚀巨唾细胞/单核细胞、组织细胞及胸腺巨噬细胞，侵害免疫系统，降低机体的抵抗力和免疫应答反应，由此形成免疫抑制，加上其他病原微生物的继发感染，患病猪死亡率可明显上升。PCV2既可经口腔、呼吸道等水平传播途径感染猪，也可以垂直传播给胎儿。该病可导致仔猪断奶多系统衰竭综合症（PMWS）、猪皮炎肾病综合症（PDNS）、母猪繁殖障碍、仔猪先天性震颤（CT）和猪呼吸道病综合症（PRDC）混合感染等相关性疾病，是危害全球养猪业的头号疫病。PCV2的发病率和死亡率因混合感染的病毒或细菌的不同而有所差异。

对2016年6月四川九寨沟某藏香猪养殖基地患病猪，结合临床表现重点围绕PRRSV、PCV2开展实验室检测，具体报告如下：

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材料与方法

1.1  临床症状及剖解病变

2016年6月四川九寨沟县某自繁自养式藏香猪养殖基地发生母猪流产，母猪体温升高达41 ℃，食欲不振，泌乳量降低，返情率升高，个别食欲废绝。仔猪临床症状主要为高稽留热、精神萎靡、消瘦、眼睑水肿，部分呼吸困难，呈腹式呼吸，并伴随腹泻症状，死亡数十例。剖解发现全身淋巴结肿大；肺呈弥漫性间质性肺炎，表面凹凸不平，部分坏死；脾脏肿大；肠道尤其是回肠和结肠段肠壁变厚，回盲口无明显变化。

图1  临床及剖检症状

无菌采集病料送至四川农业大学动物生物技术中心进行实验室检测。

1.2  主要仪器和材料

Mastercycler PCR扩增仪(Eppendorf、德国)、Gel Doc2000凝胶图像分析系统(BIO-RAD、美国)、2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料)(天根生化科技（北京）有限公司)，反转录试剂盒、TakaRa Taq DNA 酶和DL2000 DNA Marker(宝生物工程大连有限公司)。

1.3  病料处理及DNA/RNA提取

取采集病料0.5～2.0 g研磨，并按1∶3比例加入生理盐水配成病料悬液，随后-20 ℃和37 ℃反复冻融3次，12 000 r/min离心5 min后取上清液，分别按照Trizol法和酚-氯仿法提取病料中RNA和DNA。

1.4  PCR或RT-PCR鉴定

按本实验室已建立的PRRSV、猪瘟病毒（CSFV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪轮状病毒(PoRV)的RT-PCR检测方法和猪伪狂犬病病毒（PRV）、PCV2的PCR检测方法，对提取的RNA/DNA进行实验室检测。各病毒扩增体系和程序见表1、表2。

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 结 果

以实验室保存的阳性毒株作为各检测的阳性对照，若出现与阳性对照相符的目的条带，则判定为阳性，反之判定为阴性。琼脂糖凝胶电泳结果显示PRRSV（高致病性蓝耳病毒）、PCV2为阳性，结果见图2。

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防治及效果

根据藏香猪养殖基地的养殖特点，结合藏香猪养殖的独特之处，参考规模化养殖场对于此类混合感染疾病的预防和治疗措施，采取了以下防治方法：

第一时间隔离病猪，及时淘汰和无害化处理死猪。加强养殖基地灭鼠、灭虫工作，降低养殖密度，限制放养区间，防止病情进一步扩散。同时在每排圈舍入口处增设消毒池，定期加药换水，并且对加强全基地的消毒工作，确保整个污染区彻底消毒之外，对基地其他圈舍、场区进行消毒，以减少环境中的病原微生物，防止继发感染。随之紧急接种高致病性蓝耳疫苗和圆环疫苗，同时肌注左旋咪唑0.1 mL/(kg·bw），注射时一猪一针，防治交叉感染。

针对不同发病情况应对症治疗，对于母猪发热、产后不食和无乳的治疗，肌注青霉素 320万～480万IU，30%安乃近10～20 mL，地塞米松15 mg，2次/d；母猪无乳时，肌注催产素3～5 mL；食欲减退时，肌注维生素B120 mL，胃复安1 mL /（kg·bw），1次/d；仔猪成活率降低时，口服补液盐，静脉滴注葡萄糖、维生素C等；发生腹泻时，采用磺胺嘧啶钠5 g+磺胺增效1 g+2%氟哌酸100 mL，混合均匀，口服，断奶前仔猪用量为2 mL，断奶后至体重为15 kg左右仔猪的用量为3 mL，2次/d，连用3～5 d。同时全场用药，用黄芪多糖粉剂+泰乐菌素+强力霉素+电解多维混合拌料投喂(用量按说明使用) ，增强猪群免疫力。

加强饲养管理，按时监察猪群情况，发现新发病猪及时隔离。监测基地抗体水平，适时的调整免疫程序，保持抗体水平能维持在一个相对稳定的高水平。对基地母猪和公猪检测，发现受感染猪只及时淘汰。加强放养管理，开辟新放牧区并分区域放，取消对弱只、恢复期等猪只的放养。

在施行上述防治方法后，基地发病得到有效控制，并未出现更大规模的感染，部分猪只在治疗后转归痊愈，有效地降低了仔猪死亡率，可见该防治方法适用于该基地藏香猪混合感染PRRSV和PCV2。

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分析讨论

藏香猪是我国西藏地区的古老猪种，也是世界上少有的高原型猪种，藏香猪放养在山林间，常食用天麻、松茸、人参等野生药材，因此其肉质不仅风味上乘，且品质上有“六个最”之称：肉品中氨基酸含量最高，微量元素最高，脂肪含量最低，猪肠最长，猪皮最薄，鬃毛最长。藏香猪猪肉凭借上述优点逐渐受到市场青睐，市场常出现供不应求现象。但是其规模化养殖模式尚未成熟，制约了藏香猪的发展。各养殖基地在探索藏香猪科学养殖模式进程中，对其防病治病措施主要借鉴内地生猪规模化养殖规范，但这些规范并不针对藏香猪养殖特点，需要结合实际适当调整，才能实现科学有效地养殖。

PRRSV和PCV2均是猪的免疫抑制性疾病，这两种病毒感染猪后，侵害机体的免疫系统，造成其淋巴器官中的T细胞和B细胞数量减少、淋巴组织中巨噬细胞浸润以及外周血和淋巴组织中的巨噬细胞、单核细胞数量升高。猪蓝耳病病毒和猪圆环病毒2型可大量破坏肺泡巨噬细胞，并造成循环淋巴细胞及黏膜纤毛清除系统的破坏，使呼吸系统的抵抗力下降，使猪易继发感染胸膜肺炎放线杆菌、支原体等病原体，给养猪业带来了巨大损失。目前PRRSV和PCV2混合感染的机理尚未研究透彻，需更多研究以解决目前问题。近年猪场混合感染发病趋势日渐增多，混合感染情况也日益复杂，常出现多个病原同时感染的情况，因此防治猪病的难度也逐渐增加。目前关于PRRSV与PCV2混合感染的报道屡见不鲜，覆盖全国，可见PRRSV与PCV2混合感染的情况已经成为各个地区猪场养殖的普遍问题，且各猪场采取的防治措施均有差异，因此在防治该病时需结合猪种养殖特点，考虑流行病史等合理采取措施。在治疗病猪时要对症下药，切勿病急乱投医，治疗时要根据用药后猪只情况及时调整用药。并且及时消毒，加强管理，减少生猪流动，对病死猪及时进行无害化处理等都是非常关键的。坚持防重于治的原则，按时监测猪群抗体水平，完善并结合实际情况调整各疾病的免疫程序。目前无论是各生猪规模化养殖场，还是各地方猪种养殖基地的发病情况都日渐复杂，混合感染发病逐渐多发，各养殖场/养殖基地都应引起重视，及时调整免疫程序，加强饲养管理。

本文选自《猪业科学》2016年第9期 “猪场兽医”栏目中P76-78

文章参考文献参见杂志 （版权归《猪业科学》所有，如转载，请注明出处）

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